a microplate reader Ang ay isang malakas na instrumento sa laboratoryo na ginamit upang makita at pag -aralan ang biological, kemikal, o pisikal na reaksyon sa mga microplates. Nagpapatakbo ito batay sa mga pamamaraan ng optical detection, pagsukat ng pagsipsip, fluorescence, o luminescence sa maraming mga sample nang sabay -sabay. Ang kakayahan na ito ng high-throughput ay ginagawang mahalaga sa biomedical research, pagtuklas ng droga, at mga diagnostic na klinikal. Ang pag -unawa sa nagtatrabaho na prinsipyo ng isang mambabasa ng mikropono ay tumutulong sa mga mananaliksik na magamit ang buong potensyal nito sa iba't ibang mga aplikasyon ng pang -agham.
1. Pangunahing Prinsipyo ng Paggawa
Ang isang microplate reader function sa pamamagitan ng pagdidirekta ng ilaw (o enerhiya ng paggulo) sa pamamagitan ng bawat balon ng isang microplate at pagsukat ng pinalabas o ipinadala na signal. Ang pangunahing prinsipyo ay nagsasangkot ng tatlong pangunahing hakbang:
Hakbang 1: ilaw na mapagkukunan at pagpili ng haba ng haba
Ang instrumento ay gumagamit ng isang ilaw na mapagkukunan (tulad ng LED, Tungsten, o Xenon lamp) upang maglabas ng ilaw sa isang tiyak na haba ng haba. Pinipili ng isang monochromator o optical filter ang nais na haba ng haba batay sa mga kinakailangan sa assay.
Hakbang 2: Pakikipag -ugnay sa Halimbawang
Ang napiling ilaw ay dumadaan sa sample sa mga balon ng microplate. Depende sa mode ng pagtuklas, ang sample ay maaaring sumipsip, fluoresce, o maglabas ng luminescence bilang tugon sa enerhiya ng paggulo.
Hakbang 3: Deteksyon at Pagsusuri ng Signal
Ang isang detektor (karaniwang isang photomultiplier tube o CCD sensor) ay nakakakuha ng nagresultang signal mula sa bawat balon. Ang instrumento ay nagko -convert ng optical signal sa numerical data, na pagkatapos ay naproseso at nasuri gamit ang dalubhasang software.
2. Mga mode ng pagtuklas ng microplate reader
Ang mga mambabasa ng Microplate ay gumagana gamit ang iba't ibang mga prinsipyo ng pagtuklas depende sa uri ng assay na isinasagawa:
1). Pagtuklas ng pagsipsip
Sinusukat ng kung magkano ang ilaw na hinihigop ng sample sa isang tiyak na haba ng haba.
Ang ay sumusunod sa batas ng beer-Lambert, na nagsasaad na ang pagsipsip ay proporsyonal sa konsentrasyon ng analyte.
na ginamit sa ELISA, dami ng protina, at pagsusuri ng nucleic acid.
2). Pagtuklas ng fluorescence
pinupukaw ang sample na may isang mapagkukunan na may mataas na enerhiya, na nagiging sanhi ng paglabas nito ng fluorescence sa mas mahabang haba ng haba.
Sinusukat ng isang detektor ang pinalabas na intensity ng fluorescence, na proporsyonal sa konsentrasyon ng analyte.
na inilalapat sa mga assays na batay sa cell, DNA/deteksyon ng protina, at screening ng high-throughput na gamot.
3). Luminescence Detection
Sinusukat ang ilaw na inilabas mula sa isang kemikal o biological reaksyon nang walang isang panlabas na mapagkukunan ng ilaw.
Karaniwan sa Luciferase assays, ATP quantification, at chemiluminescent immunoassays.
3. Mga Aplikasyon ng Microplate Readers
Ang mga mambabasa ng Microplate ay malawakang ginagamit sa iba't ibang mga larangan ng pang -agham, kabilang ang:
Mga Diagnostic ng Medikal (Mga Pagsubok sa ELISA para sa Deteksyon ng Sakit)
Pananaliksik sa Pharmaceutical (Pagtuklas ng Gamot at Pag-screening ng High-Throughput)
molekular na biology (DNA at dami ng protina)
Pagsubok sa Kaligtasan ng Pagkain (Contaminant at Toxin Detection)
Pagsubaybay sa Kalikasan (Pagtatasa ng Tubig at Lupa)
Sa konklusyon, ang prinsipyo ng a Microplate Reader umiikot sa paligid ng optical signal detection gamit ang pagsipsip, fluorescence, o luminescence. Sa pamamagitan ng pagsusuri ng maraming mga sample nang sabay -sabay, pinapayagan nito ang mabilis at tumpak na mga sukat sa pananaliksik, diagnostic, at pang -industriya na aplikasyon. Tulad ng pagsulong ng teknolohiya, ang mga mambabasa ng microplate ay patuloy na gumaganap ng isang mahalagang papel sa modernong agham sa laboratoryo, pagpapabuti ng kahusayan at kawastuhan sa mga natuklasang pang -agham.
